Le laboratoire de transgénèse offre aux chercheurs intéressés un service d’injections pronucléaires pour produire des souris et rats transgéniques.  Il nous fera plaisir de vous conseiller sur la création de vos constructions transgéniques ou de répondre à vos questions sur les souris et les rats transgéniques, l’élevage, etc. 

Pour demander une construction transgénique, vous devez fournir :

1. Le formulaire Laboratoire de transgénèse « I »,  Demande de service – Construction de souris ou rat transgénique et microinjection de cellules souches ; 
2. 5µg d’ADN linéarisé dilué dans un tampon TloE à une concentration de 100ng/µl.  Le laboratoire de transgénèse fournira le tampon requis.
3. Une photo d’ADN linéarisé sur un gel avec les marqueurs appropriés.
4. Tous les chercheurs du CRCHUM doivent fournir un numéro de protocole valide avant que notre laboratoire effectue les micro-injections.  On peut se procurer tous les formulaires requis pour obtenir un nouveau numéro de protocole ou une modification de protocole sur  Intranet  section CIPA/ Formulaires.
5. Les chercheurs provenant d’autres établissements doivent fournir un numéro de protocole valide de leur établissement avant que nous puissions procéder à réaliser le service demandé.  

Le laboratoire transgénèse effectue la micro-injection sur la lignée de souris B6C3F1.  Nous pouvons aussi effectuer des micro-injections sur d’autres souches.  Veuillez communiquer avec Mitra Cowan pour une information plus détaillée à : mitra.cowan.chum@ssss.gouv.qc.ca.

Toutes les constructions transgéniques sont effectuées selon le principe du premier arrivé, premier servi.  Il nous fera plaisir de vous donner un devis estimatif avant la micro-injection.

Chaque séance de micro-injection comprend :

1. La microinjection de 300 à 500 embryons;
2. Le transfert chez un minimum de 10 femelles pseudogestantes afin de créer un minimum de 20 souriceaux fondateurs potentiels pour la sélection. 

Notre taux moyen de fondateurs est de 16 % dans notre lignée standard B6C3F1.  Ce qui correspond à  une moyenne de trois souris fondatrices par séance de micro-injection.  Comme il s’agit d’une moyenne, un nombre variable de fondateurs est évidemment produit pour chaque construction micro-injectée.  Nous garantissons un minimum de deux fondateurs pour chaque construction micro-injectée.  Si, après  sélection, vous n’avez pas deux souris fondatrices, nous évaluerons avec vous si cela provient de problèmes avec l’ADN (c.-à-d. ADN embryonnaire létal/sale) ou si nous pouvons apporter des changements (c.-à-d. un nouvel ADN purifié, des concentrations d’ADN micro-injecté plus basses ou plus élevées, etc.). qui permettront d’améliorer votre taux de fondateurs créés lors d’une seconde séance de micro-injection.

Les souriceaux transgéniques potentiels naîtront trois semaines après la micro-injection.  Le laboratoire de transgénèse sèvrera les nouveau-nés et coupera les queues en même temps pour la sélection et l’identification des fondateurs transgéniques. Après leur identification, ils seront transférés à l’animalerie indiquée par le chercheur. Si les fondateurs transgéniques n’ont pas été identifiés deux semaines après la date de sevrage, tous les nouveau-nés seront transférés à l’animalerie appropriée. 

Le chercheur doit fournir au laboratoire de transgénèse tous les résultats rattachés à la sélection.  Ceci afin de nous aider à compléter nos dossiers et à fournir les meilleurs services possibles. 

Tarifs

Information : : Mitra Cowan, responsable du service
mitra.cowan.chum@ssss.gouv.qc.ca
514 890-8000 poste 35224