La cryopréservation des gamètes de souris permet aux chercheurs de conserver des lignées de souris qui représentent un grand intérêt pour la recherche ou qui ne sont pas activement utilisées.  En ce moment, nous fournissons un service de cryopréservation d’embryons seulement de souris ou de rats.  Les seules lignées de souris qui ont été cryopréservées avec succès, en utilisant du sperme de souris, étaient des souches d’origine hybride.  Nous ne pouvons garantir l’efficacité de la fécondation in vitro du sperme de souris cryopréservé de souches consanguines. Comme beaucoup de lignées sont croisées avec des souches consanguines, afin de conserver le contexte génétique pour le chercheur, nous recommandons d’utiliser et nous congelons seulement les embryons de souris fécondées.

Il existe deux façons de cryopréserver les embryons de souris.  La première méthode, et la plus utilisée,  est de cryopréserver les embryons hétérozygotes.  Pour cela, le laboratoire de recherche fournit des mâles reproducteurs hétérozygotes ou homozygotes qui seront alors accouplés à des femelles superovulées pour générer des embryons hétérozygotes destinés à être cryopréservés.  La seconde méthode est de cryopréserver des embryons provenant de lignées homozygotes.  Bien que ce soit un choix également viable pour la cryopréservation à long terme d’une lignée de souris, il faut que le chercheur produise les femelles nécessaires pour l’accouplement avec les mâles reproducteurs. Comme la superovulation est souvent moins efficace chez des femelles homozygotes consanguines, le chercheur devra souvent fournir entre 30 à 40 femelles homozygotes pour l’accouplement avec les mâles reproducteurs.

Pour demander une cryopréservation, vous devez fournir :

1. Le formulaire du Laboratoire de transgénèse « L »,  Demande de service – Cryopréservation ; 
2. Entre 7 à 10 mâles reproducteurs testés, âgés de 2 à 6 mois;
3. Tous les chercheurs du CRCHUM doivent fournir un numéro de protocole valide avant que notre laboratoire effectue la cryopréservation.  On peut se procurer tous les formulaires requis pour obtenir un nouveau numéro de protocole ou une modification de protocole sur l’Intranet  section CIPA/ Formulaires.
4. Les chercheurs d’autres établissements doivent fournir un numéro de protocole valide de leur établissement avant que nous puissions procéder à réaliser le service demandé. 
5. Les chercheurs provenant d’autres établissements doivent fournir un numéro de protocole valide de leur établissement avant que nous puissions procéder à réaliser le service demandé. 

Chaque lignée cryopréservée comprend :

1. La commande des femelles de type sauvage, les fait superovuler et  accoupler avec les mâles reproducteurs;
2. La cryopréservation entre 200 et 300 embryons dans de l’azote liquide pour entreposage à long terme;
3. Un test de dégel pour le contrôle de la qualité de chaque lignée que nous cryopréservons afin d’assurer la viabilité des embryons pour redérivation future de la lignée.

Si le chercheur désire cryopréserver une lignée d’origine homozygote, il est préférable de communiquer avec Mitra Cowan à l’adresse électronique : mitra.cowan.chum@ssss.gouv.qc.ca afin de préciser combien de souris seront nécessaires et quel calendrier sera suivi.

Pour un entreposage à long terme, le laboratoire transgénèse conservera chaque lignée dans de l’azote liquide dans deux réservoirs différents pour redondance. Les frais annuels sont de 100 $ par lignée.

  Tarifs

Information : : Mitra Cowan, responsable du service
mitra.cowan.chum@ssss.gouv.qc.ca
514 890-8000 poste 35224